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對氣相色譜儀校準方法的思考

更新時間:2022-05-10點擊次數:3882

對氣相色譜儀校準方法的思考

1. 氣相色譜儀的概述

氣相色譜儀是由載氣把樣品帶入色講柱,利用樣品中各組分在色譜柱中氣相和固定相間的分配及吸附系數不同進行分離,并通過檢測器進行檢測的儀器。根據各組分在色譜柱中的保留時間和響應值進行定性和定量分析。該儀器由氣路系統、進樣系統、分離系統、溫控系統、檢測系統和數據處理系統組成。

2. 氣相色譜儀校準要求

該儀器的計量性能應符合下表的要求:

檢定項目

計量性能要求

TCD

ECD

FID

FPD

NPD

載氣流速穩定性(10min

≤1%

≤1%

——

——

——

柱箱溫度穩定性(10min

≤0.5%

程序升溫重復性

≤2%

基線噪聲

≤0.1mV

≤0.2mV

≤1pA

≤0.5nA

≤1pA

基線漂移(30min

≤0.2mV

≤0.3mV

≤10pA

≤0.5nA

≤5A

靈敏度

≥800mV?mL/mg

——

——

——

——

檢測限


≤5pg/nL

≤0.5ng/s

≤0.5ng/s(硫)

≤5ng/s(氮)

≤0.5ng/s(磷)

≤10pg/s(磷)

定性重復性

1%

定量重復性

3%

儀器輸出信號使用赫茲(Hz)為單位時,基線噪聲≤5Hz,基線漂移(30min)≤20Hz

a.   微量注射器

量程:10 μL,最大允許誤差士12%

b.  鉑電阻溫度計

溫度測量范圍:不小于300 ℃,最大允許誤差士0.3 ℃。

c.  流量計

皂膜流量計測量范圍(0~100)mL/min,準確度不低于1.5級。

d.  氣壓表

測量范圍(800~1 060)hPa,最大允許誤差士2.0 hPa

3.計量器具校準

(1)  環境條件

氣相色譜儀應在室溫為(5~35,相對濕度:(20~85%,室內不得存放易燃、易爆和強腐蝕性的物質,無機械振動和電磁干擾。

(2)  校準使用標準物質

名稱

含量

相對擴展不確定度(K=2)

用途

備注

-甲苯溶液

5mg/ml50mg/ml

≤3%

TCD

液體

正十六烷-異辛烷溶液

10-1000ng/μL

FID

無水乙醇溶液

10ng/μL

FPD

丙體六六六-異辛烷溶液

0.1ng/μL

TCD

氮(氦,氫,氬)中甲烷:

(100-1000)μmol/mol

FID

氣體

(10-1000)μmol/mol

(3)氣相色譜儀校準項目

a.  外觀檢測

b.  載氣流速穩定性

c.  柱箱溫度穩定性

d.  程序升溫重復性

e.  基線噪聲

f.  基線漂移

g.  靈敏度

h.  檢測限

i.  定性、定量重復性

(4)  外觀檢查

用目測、手動法進行檢查。

(5)  載氣流速穩定性校準

a.  選擇適當的載氣流速,等待穩定后,用流量計連續測量7次;

b.  以7次測量平均值的相對標準偏差即為穩定性。

(6)  柱箱溫度穩定性校準

a.   把溫度計的探頭固定在柱箱中部,設定柱箱溫度為70 ℃;

b.   等待儀器溫度穩定后,連續測量10 min,每分鐘記錄一個數據;

c.   然后計算柱箱溫度穩定性。

(7)  程序升溫重復性校準

a.   把溫度計的探頭固定在柱箱中部,選定初溫60℃,終溫200 ℃,升溫速率10 ℃/min;

b.  待初溫穩定后,開始程序升溫,每分鐘記錄數據一次,直至達到終溫;

c.  此步驟重復3次,計算出相應點的相對偏差,取其最大值為程序升溫重復性。

(8)    熱導(TCD)檢測器

a.  噪聲和漂移

設置檢定條件,記錄基線30 min,選取基線中噪聲最大峰-峰高對應的信號值為儀器的基線噪聲;基線偏離起始點最大的響應信號值為儀器的基線漂移。

b.  靈敏度

使用液體標準物質檢定:設置好檢定條件后,待基線穩定后,用微量注射器注人(1~2)μL,濃度為5 mg/mL50 mg/mL的苯-甲苯溶液,連續測量7次,記錄苯峰面積。使用氣體標準物質檢定:通人摩爾分數為(100~ 10 00)μmol/mol的甲烷氣體標準物質,連續測量7次,記錄甲烷峰面積。

計算靈敏度。

檢測器有:電子捕獲(ECD)檢測器、火焰離子法(FID)檢測器、火焰光度(FPD)檢測器、氮磷(NPD)檢測器,每個檢測器都對應相應的標準物質,校準步驟都一樣的。

(9) 定性和定量重復性校準

儀器的定性和定最重復性是使用標準物質連續測量7次溶質的保留時間和峰面積測量的相對標準偏差RSD表示,該相對標準偏差RSD即為定性和定量重復性參考值。

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公司背景介紹:

華譜&澤恒是專注于為生物制藥行業提供實驗室儀器計量校準、GMP驗證服務/3Q驗證/設備確認/廠房驗證的專業服務商。我們給制藥客戶解決的是一站式QC/QA/工程/驗證等事業部的質控外包服務。

我們活躍于許多關鍵市場領域,從細胞/基因治療領域、抗體藥方向、干細胞治療到疫苗生產等生物制藥領域,一直以來都是圍繞生物醫藥客戶實現讓讓制藥體系更安全"為使命,提高服務的效率、降低行業的成本、踐行好的客戶服務體驗。自主品牌:華譜(上海)檢測技術有限公司、澤恒計量檢測(北京)有限公司。




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